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細(xì)胞培養(yǎng)
一、準(zhǔn)備工作
準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試等。
二、取材
在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞,經(jīng)過一定的處理后接入培養(yǎng)器血中,這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),實(shí)際上幼體組織比成年個(gè)體的組織容易培養(yǎng),分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理,盡快培養(yǎng),因故不能馬上培養(yǎng)時(shí),可將組織塊切成黃豆般大的小塊,置4℃的培養(yǎng)液中保存。取組織時(shí)應(yīng)嚴(yán)格保持無菌,同時(shí)也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理組織和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時(shí)容易帶菌,為減少污染可用抗菌素處理。
三、培養(yǎng)
將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng),則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,幾個(gè)小時(shí)后組織塊可貼牢在底部,再加入培養(yǎng)基。如系細(xì)胞培養(yǎng),一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),按要求以一定的量(以每毫升細(xì)胞數(shù)表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)器皿后,立即放入培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞盡早進(jìn)入生長狀態(tài)。
正在培養(yǎng)中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時(shí)間觀察一次,觀察的內(nèi)容包括細(xì)胞是否生長良好,形態(tài)是否正常,有無污染,培養(yǎng)基的PH 是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對(duì)培養(yǎng)溫度和CO2 濃度也要定時(shí)檢查。
我們代理和經(jīng)銷的分子生物學(xué)試劑、生化試劑、免疫試劑、ELISA試劑盒、細(xì)胞株、培養(yǎng)基、胎牛血清、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品等試劑產(chǎn)品,已被廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)基礎(chǔ)與開發(fā)研究、生化領(lǐng)域、生物技術(shù)等諸多領(lǐng)域。我們長期積累的客戶已遍布國內(nèi)外各地大學(xué)、研究所、醫(yī)院、國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等單位。
以上是細(xì)胞培養(yǎng)需注意哪些過程