ELISA試劑盒原理zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定，在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用，ELISA試劑盒因?yàn)楹苋菀妆幌吹?。因此Elisa試劑盒原理液中也必須添加封閉液。請(qǐng)勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%）Elisa試劑盒，它會(huì)降低特異 結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液，后者可協(xié)助洗滌過(guò)程中的封閉。
ELISA試劑盒原理有所不同，是*的。它們與開(kāi)放位點(diǎn)結(jié)合并封閉，同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的 抗原分子。常用的Elisa試劑盒包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過(guò)，它的缺點(diǎn)在于Elisa試劑盒能與 Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個(gè)問(wèn)題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。Elisa試劑盒原理抗體濃度須優(yōu)化。Elisa試劑盒原理留下來(lái)的操作步驟，ELISA試劑盒但是如果試劑稍有不同，則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住，非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。為了防止這一點(diǎn)， 切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。Elisa試劑盒檢測(cè)試劑要適量，另一點(diǎn)也很顯而易見(jiàn)：切勿使用過(guò)多的檢測(cè)試劑。如果濃度過(guò)高，或者未正確稀釋，則會(huì)導(dǎo) 致高背景。也不要顯色過(guò)度，如有必要，優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。
ELISA試劑盒是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái)，發(fā)展十分迅速，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。Elisa試劑盒原理是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于Elisa試劑盒原理的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種Elisa試劑盒孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果 的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:Elisa試劑盒原理用于檢測(cè) 抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗 原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是Elisa試劑盒雙抗體夾心法及ELISA間接法。