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牛巴貝斯抗體(Babesia)ELISA試劑盒
產(chǎn)品時間:2016-08-13
牛巴貝斯抗體(Babesia)ELISA試劑盒
英文名稱:Cattle Babesia antibody ELISA kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T

本產(chǎn)品僅用于科研,不用于臨床

牛巴貝斯抗體(BabesiaELISA試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

使用目的:
本試劑盒用于測定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中巴貝斯蟲病表達。

實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中牛巴貝斯蟲病表達。用純化的牛巴貝斯蟲病抗體包被

微孔板,制成固相抗體,可與樣品中巴貝斯蟲病相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成

分后再與 HRP 標記的巴貝斯蟲病抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗

滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終

的。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,從而判定

標本中牛巴貝斯蟲病的存在與否。

牛巴貝斯抗體(BabesiaELISA試劑盒
英文名稱:Cattle Babesia antibody ELISA kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融

2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 孔、陽性對照 孔、空白對照 1

孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先

加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不

觸及孔壁,輕輕晃動混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn))。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止

液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

計算和結(jié)果判定:

試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

陰性判定:樣品 OD 臨界值(CUT OFF)者為巴貝斯蟲病陰性

陽性判定:樣品 OD 值≥ 臨界值(CUT OFF)者為巴貝斯蟲病陽性

。

注意事項

1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全。

牛巴貝斯抗體(BabesiaELISA試劑盒保存條件及有效期

1.試劑盒保存:;2-8℃。

2.有效期:個月

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